Troisième séance de travaux pratiques

LA MEIOSE

BUT DU TP : Le but de cette troisième séance de TP est d'illustrer le cours sur la méiose (cours de S.DESCHAMPS). L'analyse de la méiose est réalisée à travers l'étude de la spermatogenèse chez le rat.

A - Coupe de testicules de rat sain (coloration à l'hématoxyline et APS).
   - Etude de coupes de tubules séminifères avec le tissu interstitiel
        * Dans le tissu interstitiel on observe essentiellement des cellules de Leydig (synthèse de testostérone), des vaisseaux sanguins et quelques fibroblastes.
        * Dans les tubules on observe les cellules de Sertoli et les cellules germinales
(si on veut voir les différents stades de la spermatogenèse, il va falloir observer plusieurs tubules : on ne trouvera pas de spermatides allongés et de spermatozoïdes dans un même tubule!!)

    - 6 types cellulaires :
        * Les cellules de Sertoli - on les observe à la base du tubule, juste au dessus de la lame basale. Leur noyau est petit et multilobé. On observe la plupart du temps un gros nucléole
        * Les spermatogonies - Très peu de spermatogonies par tubule. On les observe aussi collées à la base de l'épithélium germinatif. Noyau de petite taille. Ressemblent au Sertoli mais nucléole nettement moins visible.
        * Les spermatocytes I (stade Pré-leptotène et Leptotène) : On voit bien les chromosomes qui s'individualisent. Le noyau reste de taille moyenne
        * Les spermatocytes I (stade pachytène) : Leur noyau est de très grande taille et facilement repérable.
        * Les spermatides rondes : présentent vers la lumière du tube séminifère.
        * Les spermatides allongés : on observe très bien la forme très allongé du noyau de la spermatide ainsi que l'absence de flagelle dans la lumière du tube.
        * Les spermatozoïdes : Au niveau de la lumière, leurs flagelles sont orientés vers celle-ci. Leur noyau sont très allongés.
Dessiner une coupe montrant l'organisation des tubules et du tissu interstitiel puis des portions de tubules permettant de localiser les différents types cellulaires.

B - Coupe de testicules de rat irradié pendant des périodes variables (coloration HES, Eosine-Safran : colore le noyau et le cytoplasme).
Les rats de 19 jours ont été irradiés par une dose de 3 Grays. (pour information, 2 grays correspondent à une dose d'irradiation lors d'une radiothérapie).
Les testicules de rats ont été récupérés à différents temps après l'irradiation. Vous disposez de quelques lames de chaques prélèvements (dans chacun des cas , il y a une lame contrôle et une lame 3 Grays).
    - Etude des effets de l'irradiation sur la spermatogenèse sur l'ensemble de la salle
Chaque étudiant observe une lame "testicule contrôle" et une lame "testicule irradiée".
Chaque étudiant compte tenu de ses observations précédentes pourra déterminer pour un temps donné :
- La variation de taille du testicule.
- La présence de cellules de Sertoli
- La présence de spermatogonies
- La présence de spermatocytes Leptotène
- La présence de spermatocytes pachytène
- La présence de spermatides rondes
- La présence de spermatides allongées
- La présence de spermatozoïdes