Deuxième séance de travaux pratiques

LA MITOSE

 

BUT DU TP : Le but de cette deuxième séance de TP est d'illustrer le cours sur la mitose (cours de S.DESCHAMPS).

OBSERVATION DE MITOSES
A. Observation de cellules méristématiques de pointes de racines d'échalottes : coloration à l'orcéine acétique. Préparation réalisée par l'étudiant.
    a. protocole expérimental

ECHAL.gif (37244 octets) Les pointes de racines d'échalotes sont fixées chimiquement par le liquide de Carnoy : mélange alcool + acide acétique (3/1). Elles sont ensuite placées dans une solution d'alcool 70°.

- Prendre la pointe de la racine (2-3 mm).

- Déposer sur une lame et recouvrir d'une goutte d'orcéine acétique

- Ecraser la préparation avec la lamelle (squasch).

    b. Observations
        - Observer les cellules à différents stades de la mitose. Dessiner une cellule pour chaque phase.
        - Calculer l'indice mitotique (% de cellules en mitose). Cette mesure donne une idée du degré de division cellulaire dans un tissu)
    c.
microscopie électronique
        - Cliché d'une cellule en microscopie à balayage
B. Racines d'oignons préparées.
   - Coloration hématoxyline (coloration des acides nucléiques) et éosine (coloration du cytoplasme)
    - Le phragmoplaste. (différence entre les cellules animales et les cellules végétales).
    - Cliché de microscopie électronique du phragmoplaste (planche V).
C. Observation de coupes de poumon présentant des métastases.
    - Coloration hématoxyline
    - Explication sur le tissu (voir documents)
    - Rechercher les cellules en division cellulaire dans certaine métastases (taille des noyaux, caryotype aberrant...)
    - Conclusions et explications.
D. Caryotype.
    - D'une manière générale, le caryotype est utilisé pour déterminer le nombre de chromosomes spécifique d'une espèce donnée.
    - Caryotype du Pleurodèle